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如何避免病毒DNA抽提试剂盒的错误操作
发布日期：
2018-01-17
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2583
病毒DNA抽提试剂盒采用可以特异性结合核酸的离心吸附柱和*的缓冲液系统，样品裂解后，DNA在高盐条件下与硅胶膜结合，在低盐、高PH值时DNA从硅胶膜上洗脱下来。本试剂盒用于从小剂量的血液、干血点、血清、微量组织、漱口水、毛发、微切割组织等微量样品中提取基因组DNA。
1.在1.5 mL螺旋盖塑料离心管(不要使用压盖式塑料离心管)中加入0.1-0.2 mL液体样品。如果病毒需要富集，可以将1.5 mL液体在4℃ 24,000 g冷冻离心60分钟, 移弃1.3 mL后继续操作。
2.加入0.6 mL病毒DNAOUT溶液，振荡30秒混匀后室温放置10分钟。
3.振荡30秒混匀后加入0.7 mL异丙醇，振荡30秒混匀后，15,000 g室温离心15分钟。
4.移弃上清，注意不要触及管底的DNA沉淀，加入1.0 mL 70% 乙醇，振荡数秒后 15,000 g室温离心5分钟。
5.移弃上清，注意不要触及管底的DNA沉淀。再短暂离心数秒, 移弃残留上清（残留的乙醇会影响后续反应）。此时离心面的管壁上将有可见的膜状沉淀,加入200 μl 超纯水，用移液枪仔细吹打离心管管底和管壁的膜状沉淀，使其溶解。溶解液混浊或有少量不溶物是正常现象，如果溶于200 uL水而样品使用量不超过PCR体系的1/2时，不溶物一般不会影响后续PCR反应。不要离心只取上清使用，因为不溶沉淀物中含有DNA，必须取混合液使用（哪怕很浑浊）。
6.样品可以直接取适量用于PCR，也可保存于-20℃长期保存。
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